Aureobasidin A (AbA) 金担子素A/短梗霉素A

——Clontech/Takara 酵母菌/真菌转化实验选择性抗生素/酵母单杂交/双杂交研究

搜索关键词：选择性抗生素；酵母菌转化系统【酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、念珠菌】；真菌转化系统【构巢曲霉、黑曲霉】；酵母单杂交/双杂交；AUR1基因；AURA基因；IPAC合成酶；AUR1-C突变基因；

基本描述：

金担子素A（Aureobasidin A，AbA），也称为短梗霉素A，一种来源于丝状真菌Aureobasidium pullulans No. R106的环酯肽类抗真菌抗生素，在较低浓度（0.1-0.5μg/ml）下即可对酵母菌产生毒性，对该抗生素敏感的真菌包括：酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae），粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe）、光滑念珠菌（Candida glabrata）、构巢曲霉（Aspergillus nidulans）和黑曲霉（Aspergillus niger.）。金担子素AbA通过抑制真菌生长所依赖的肌醇磷脂酰神经酰胺合成酶（Inositol phosphorylceramide (IPC) synthase）活性，阻碍神经酰胺到肌醇磷脂酰神经酰胺的合成，导致鞘脂类物质的合成量不足，细胞膜破裂，进而杀死菌株。研究发现，来自酿酒酵母菌的AUR1和构巢曲霉的AURA基因，两者具有同源性，都能够编码IPC合成酶，对这两种基因的点突变，也都赋予菌株对AbA产生很强的抗性，比如：突变基因AUR1-C。

AbA用作选择性标记的应用和优势：

1.  酵母转化研究中，金担子素A（AbA）是一种非常有效的选择性标志；

2.  使用上基本不需优化条件，且创造极低背景。AbA抗性是酵母双杂交研究中理想的报告子，兼容于携带相应抗性的酵母单杂交/双杂交系统，并提供良好的筛选结果。

携带AbA抗性基因（AUR1-C）的商业化载体：

1. 大肠杆菌-酵母菌穿梭载体/大肠杆菌-曲霉穿梭载体（shuttle vector）

简单描述：pAUR载体系统包含六种大肠杆菌-酵母菌穿梭载体，每一种特别改造用于酿酒酵母、粟酒裂殖酵母或者构巢曲霉，这些载体都涵盖一个新型的药物抗性选择性标志（金担子素Aureobasidin A抗性），使得酵母菌或丝状真菌具有此抗性。

【各载体及其特点详见官网Mangkangbio】

2.  酵母报告基因载体（yeast reporter vector）

基本特性：

1）同义名：短梗霉素A

2）分子式：C₆₀H₉₂N₈O₁₁

3）分子量：1100 Da

4）纯度：≥95%

5）熔点：155-157℃

6）溶解性：不溶于水，易溶于甲醇、乙醇（0.5-5mg/ml）

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或直接参考Clontech官网。

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