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MKbio MF2004-100MG X-Gluc 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡糖苷酸环己胺盐 GUS报告基因

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X-Gluc 5--4--3-吲哚-β-D-葡糖苷酸环己胺盐(X-beta-D- glucuronide CHA salt

—转基因植物**报告基因GUS显色底物,GUS染色定性研究


搜索关键词:

β-葡萄糖苷酶(β-glucuronidase,GUS), 蓝色显色底物, 转基因植物GUS表达, GUS染色(定性), 报告基因gusA(uidA), 活性检测,  CAS:114162-64-0

 

作用机制:

X-Gluc,也称为5-Bromo-4-chloro-3-indoxyl-beta-D-glucuronide(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡糖苷酸),是β-葡萄糖苷酶(β-glucuronidase,GUS)的显色底物,由一种广泛使用的报告基因gusA(uidA)所编码。GUS水解X-Gluc,生成一种无色的葡萄糖醛酸和一种肉眼可见的氯-溴靛蓝(chloro-bromoindigo)深蓝色沉淀。利用这一特性,X-Gluc常用来检测植物细胞和组织中的GUS表达;另外,X-Gluc还能用来检测大肠杆菌引起的感染状况;或检测食物或水源是否受细菌污染。

 

主要应用:转基因植物报告基因GUS活性检测,X-gluc用作显色底物。

普遍应用优势在于:绝大多数植物细胞内不存在内源性的GUS活性,而且GUS基因表达产物具有检测方法简单、灵敏度高,易于定量及定性分析,能够与其他蛋白质基因融合等优势,因此,GUS基因为植物工程研究中应用**泛的报告基因(报道基因)之一。


1. GUS活性检测(组织化学定位法,定性研究)

GUS催化底物X-gluc在酶活性位点生成深蓝色沉淀,为研究外源基因在植物中表达具体部位研究提供很好的研究手段。且GUS酶和显色产物非常稳定,植物中可以积累。

1.1     GUS染色液制备【作为参考,可按照具体实验条件来调整】 具体见官网maokangbio。

1.2     GUS定性染色步骤 具体见官网maokangbio。


2.  GUS活性检测(荧光分析法,定量研究)

GUS催化荧光底物MUG 4-甲基伞型酮-beta-D-葡糖苷酸,将其水解为4-MU(4-甲基伞型酮)和β-D-葡萄糖醛酸。4-MU中的羟基解离后在365nm的光激发下产生455nm的荧光。此时用荧光分光光度计测定得到的是相对值,因此同时需要用标准物4-MU进行校准。

荧光定量分析GUS活性有两种基本方法:1)在一个时间点测定GUS酶作用产物的总荧光量,需要设定空白对照,以消除内源荧光强度;2)测定一段时间内GUS的动力学过程。在酶反应初始阶段,酶作用产物与时间呈线性关系,而内源性荧光物质的荧光量与时间无线性关系。由此可计算GUS酶活力。GUS酶活性通常以μg MU/min/mg蛋白质。有时也可以用样本的鲜重来表示。

具体步骤见官网maokangbio。

 

基本特性:

1)   CAS NO:114162-64-0

2)   英文同义名:5-bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-glucuronic acid, cyclohexylammonium salt; X-beta-D- glucuronide CHA salt; X-Gluc CHA Salt; X-glu CHA Salt; X-glcA CHA Salt; BCIG CHA Salt;

3)   分子式:C14H13BrClNO7 • C6H13N

4)   分子量:521.79 g/mol

5)   纯度:>99%(HPLC)

6)   外观:白色至类白色结晶性粉末

7)   溶解性:DMF、甲醇

8)   化学结构式:

       


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MF2004-100MG

X-Gluc 5--4--3-吲哚-β-D-葡糖苷酸环己胺盐

100mg

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MF2004-1000MG

X-Gluc 5--4--3-吲哚-β-D-葡糖苷酸环己胺盐

1g

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相关产品:更大包装或产品技术问题,请来电/在线咨询,电话:021-54736159 。网站:www.maokangbio.com

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产品名称

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MF2005-250MG

MUG 4-甲基伞型酮-beta-D-葡糖苷酸

250mg

580

1-2

MF2005-1000MG

MUG 4-甲基伞型酮-beta-D-葡糖苷酸

1g

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注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

 

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作,主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。 本公司秉承以人为本,以诚为信、合同守信的经营理念。坚持"品质保障"的原则为广大客户提供优质产品。


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